มาตรฐาน Exosome แช่แข็งเปลี่ยนปริมาณการวิจัยวิทยาศาสตร์ชีวภาพ

การวิจัยเอ็กซอโซมได้ปรากฏขึ้นเป็นแนวโน้มการเปลี่ยนแปลงในวิทยาศาสตร์ชีวภาพ โดยเปิดเผยว่า กลีบนอกเซลล์เหล่านี้เป็นตัวกลางที่สําคัญในการสื่อสารระหว่างเซลล์นักวิทยาศาสตร์ต้องเผชิญกับปัญหาอย่างต่อเนื่อง ในการแยกการประกอบลักษณะและการรักษาตัวอย่าง exosome ที่ตรงกันสําหรับการทดลองที่สามารถผลิตใหม่ได้

วิธีการสกัดและเก็บรักษาแบบดั้งเดิมมักทําให้ความสมบูรณ์แบบของเอ็กโซโซมเสื่อม ส่งผลให้เกิดการสูญเสียกิจกรรมและปัญหาความมั่นคงที่อาจทําให้ผลการวิจัยเสื่อมปัญหานี้กลายเป็นฉุนแรงโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเทคนิคปริมาณ เช่น ไซโตเมตรการไหล (Flow cytometry), Western blot (WB) และ ELISA ซึ่งการขาดการควบคุมแบบมาตรฐานที่มีคุณภาพสูงทําให้การวัดที่แม่นยําและการเปรียบเทียบระหว่างการศึกษายาก

เทคโนโลยีการแห้งแบบต้มเย็น เป็นทางออกที่สําคัญ สําหรับการปรับความมั่นคงของเอ็กโซโซมในระยะยาว โดยการกําจัดน้ําการผสมผสานผงรักษาความสมบูรณ์แบบทางโครงสร้างและกิจกรรมทางชีววิทยาในขณะที่เอาชนะข้อจํากัดของวิธีการเก็บรักษาที่ปกติ.

เมื่อเปรียบเทียบกับเอ็กโซโซมที่แยกออกมาใหม่รุ่นแบบหลอดไหลโฟลิสมีลักษณะการใช้งานที่ดีกว่า ไม่จําเป็นต้องทําความเย็นในอุณหภูมิที่ต่ํามาก โดยยังคงคงความมั่นคงนานกว่าสองปีที่ 2-8 °Cความก้าวหน้านี้ทําให้กระแสการทํางานในห้องปฏิบัติการง่ายขึ้นมาก ลดต้นทุนการเก็บรักษา และประกันความต่อเนื่องในการวิจัย

การพัฒนาล่าสุดในมาตรฐาน exosome lyophilized ให้นักวิจัยมีเครื่องมือในการแก้ปัญหาทดลองที่สําคัญ:

• ความบริสุทธิ์สูง:โปรต็อกอล ultracentrifugation ความแตกต่างอย่างเข้มข้นให้ผลิตประชากร exosome ด้วยสารพิษอย่างน้อยจากแหล่งชีววิทยาต่าง ๆ รวมถึงพลาสมา, เซรัม, นมและสื่อการปลูกเซลล์
• การตรวจสอบหลายแบบ:การประเมินคุณภาพที่ครบถ้วนใช้ Western blot, การวิเคราะห์การติดตามอนุภาคนาโน (NTA), ไซโตเมตรการไหล และการทดสอบการทํางานเพื่อตรวจสอบความสม่ําเสมอของชุด
• การใช้งานทั่วไป:มาตรฐานเหล่านี้เป็นหน่วยควบคุมที่น่าเชื่อถือสําหรับเทคนิคต่างๆ ตั้งแต่การกําหนดปริมาณของเครื่องหมายชีวภาพ ไปจนถึงการประเมินการจับตัวของภูมิคุ้มกันและการพัฒนายา.

ระบบมาตรฐาน exosome รุ่นปัจจุบันรวมถึงแหล่งชีววิทยาหลายอย่างและตัวแปรเฉพาะ:

ออกแบบด้วยโปรตีนหลอดไฟ EGFP, mScarlet หรือ mTagBFP2 สําหรับการติดตาม

ได้แยกจาก MSCs ที่มาจากไขมัน ซึ่งมีโมเลกุลการส่งสัญญาณที่สําคัญสําหรับการบํารุงรักษา

รวมตัวอย่างจาก โรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (PC-3), โรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (HT-29, CaCo2), โรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (MCF-7), โรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (A-375), โรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (RPMI), โรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (A-549), และโรคมะเร็งต่อมลูกหมาก (PANC-1).

เอ็กซอโซมมุ่งหมายทั่วไป ที่แยกจากเซรั่มของมนุษย์ เพื่อการนําไปใช้ในงานวิจัยพื้นฐาน

การวิเคราะห์เปรียบเทียบอย่างเข้มงวดแสดงให้เห็นว่า exosomes lyophilized รักษาประสิทธิภาพที่เท่าเทียมกันกับตัวอย่างสดที่เก็บไว้ที่ -20 °Cการประเมินเซตเมตรไหลแสดงให้เห็นช่วงความก้าวหน้าที่เปรียบเทียบได้ ระหว่างยาเสพติดแข็งและยาเสพติดหลอดเลือดขอดขณะที่ NTA ยืนยันว่าการกระจายขนาดยังคง

การเตรียมเอ็กโซโซมแบบมาตรฐานเหล่านี้เป็นการก้าวหน้าที่สําคัญไปสู่ผลการวิจัยที่สามารถผลิตใหม่ได้และเปรียบเทียบได้มากกว่าในห้องปฏิบัติการการนํามาใช้มันอาจช่วยแก้ปัญหาปัจจุบันในวิธีการวิจัย exosome ในขณะที่ทําให้การใช้ใหม่ในการวินิจฉัยและการพัฒนาการรักษา.